Базовый мониторинг чистых помещений  

Целью базового микробиологического мониторинга является отслеживание контаминации воздуха, поверхностей и персонала.

Мониторинг воздуха

Aктивный метод (Пробоотборник воздуха) – известный объем воздуха проходит через или вокруг собирающей среды, в которой задерживаются микроорганизмы. После инкубации устанавливается их количество и пересчитывается на 1 м? воздуха.

Используемые пробоотборники для воздуха:

• Оборудование для отбора проб, работающее по центрифужному принципу – воздух забирается через вращающиеся орбитальные лопасти, которые выталкивают частицы на полоску-вкладыш с культивационной средой. Полоска с агаром затем инкубируется.
• Оборудование для отбора воздуха через желатиновый фильтр – воздух фильтруется через желатиновый фильтр, который затем переносится на чашку с агаром. Желатин растворяется в агаровой среде и чашка инкубируется.
• Оборудование для отбора воздуха просеиванием на агаровую чашку – воздух прогоняется через отверстия в круговой ситообразной пластинке и осаждается на поверхности агаровой чашки, после экспозиции чашка инкубируется (см. рисунок).

Оборудование для отбора воздуха просеиванием на агаровую чашку

Преимущество: Можно проверить определенный объем воздуха.
Недостаток: С началом работы прибора нарушается ламинарный поток воздуха, что является неблагоприятным моментом для критических мест. Не охватывает всю операцию – пробоотбор проводится одноразово в ходе рабочей операции в контролируемом помещении.

Пассивный метод (Седиментационные чашки) – заключается в выдерживании седиментационных чашек с агаровой культивационной средой в течение определенного времени. После инкубации подсчитывается количество колоний. Рекомендуемое время экспозиции – 4 часа, при этом необходимо проверить ростовые свойства чашек после установленного времени открытия. В определенной среде чашки могут высыхать быстрее и в связи с этим теряют способность обеспечивать рост микроорганизмов.

Пробоотбор проводится в течение всего времени асептического наполнения в контролируемом помещении, по прошествии определенного времени чашки заменяются. Рекомендуется, чтобы чашки заменяли сами операторы, во избежание входа в помещение дополнительного персонала как потенциального источника контаминации.

Преимущество: минимальное вмешательство в критические рабочие точки.
Недостаток: количество исследованного воздуха неизвестно.

Точки пробоотбора  – должны размещаться в критических местах в классе чистоты A, а в классах B, C, D прежде всего в местах интенсивного передвижения персонала или материалов -  в шлюзах. В классе A пробоотбор не должен мешать рабочему процессу.

Мониторинг поверхностей и персонала

Мазки стерильным тампоном (Swabs) – количественно или качественно. Контролируемая поверхность вытирается увлажненным стерильным тампоном, собранные микроорганизмы переносятся на поверхность агара и инкубируются. Альтернативной возможностью является перенос собранных микроорганизмов в стерильную жидкость, фильтрование, перенос фильтра на агаровую чашку и инкубация.

Преимущество: после отбора пробы исследованную поверхность не нужно дезинфицировать.
Недостаток: захват меньшего количества микроорганизмов.

Контактные чашки или пластины (Contact Plates) – используются агаровые чашки для установления общего количества микроорганизмов и чашки для установления количества грибов.

Необходимо проверять ростовые свойства используемых сред. Если используется только один вид агаровой среды, необходимо проверить способность захватить широкий спектр микроорганизмов, включая грибы. Несмотря на то, что производители предоставляют среды для отпечатков, нейтрализующие дезсредства, необходимо доказать, что отпечатывание дезинфицированной поверхности не окажет влияние на рост микроорганизмов. На практике это означает проверку ростовых свойств на чашках, на которых проводились отпечатки с дезинфицированной поверхности.

Точки отбора проб у персонала:

• отпечатки перчаток (5 пальцев – обе руки)
• отпечатки с рабочей одежды (маска, предплечья, грудь, темя)

Точки отбора проб с оборудования и в помещении

• критические места – там, где оборудование находится в непосредственном контакте с продуктом (например, наполняющие иглы, емкость для пробок, направляющие пазы для резиновых пробок, места, где продукт находится открытым)
• менее критические места – двери и окна шлюза, панели управления, пол, стены, оборудование и т.д. (необходимо выявить оборудование, которое может быть контаминировано персоналом, и точки, где под действием электростатики могут находиться частицы с зарядом, несущие на поверхности микроорганизмы)

Отпечатки с критических точек и одежды персонала берутся непосредственно после окончания асептического наполнения, остальные отпечатки берутся в ходе производственного процесса.

Преимущество: высокий захват микроорганизмов.
Недостаток: после отбора проб необходимо исследованную поверхность продезинфицировать и убрать остатки среды.

Дополнительный мониторинг для асептических производств

Стерильность первичных упаковок

Устанавливается стерильность упаковок (например, флаконов и пробок), которые асептически наполняются инъекционным препаратом. Пробы отбираются случайным методом в зоне наполнения. В микробиологической лаборатории проводится инкубация в жидкой среде и оценивается стерильность. Помутнение среды означает контаминацию, прозрачность среды свидетельствует о стерильности.

Мониторинг нагрузки используемых дезсредств

Имеются в виду дезсредства, используемые для санитации чистых помещений. Отбирается 100 мл дезсредства после окончания санитации, затем фильтруется через стерильный фильтр, далее следует промывание с целью устранения антимикробного влияния отфильтрованного дезсредства. После инкубирования фильтра устанавливается количество образовавшихся колоний. Критерий приемлемости – 0 КОЕ /100 мл, т.е. стерильность.

Мониторинг нагрузки инъекционного раствора перед фильтрацией – Bioburden

Отбирается 100 мл инъекционного раствора перед стерилизацией (у асептического наполнения под стерилизацией понимается фильтрация через фильтр с размером пор 0,22 ?м) в период непосредственно перед окончанием наполнения. Обработка проводится в микробиологической лаборатории. Проба фильтруется через стерильный фильтр, который промывается водным раствором (устранение возможного антимикробного действия отфильтрованного продукта). После инкубации фильтра устанавливается количество образовавшихся колоний. Критерий приемлемости —  10 КОЕ/100 мл. У некоторых препаратов данный лимит предфильтрационной нагрузки является труднодостижимым. Он установлен в документе «GMP Note for Guidance on Manufacture of the finished dosage form» (Апрель 1996) от European Agency for the Evaluation of Medicinal Products.Контролирующие организации настаивают на его выполнении.

Мониторинг стерильности газообразных сред

Контролируется азот и сжатый воздух.

Устанавливается стерильность газа за бактериальным фильтром. Через простерилизованную воду для инъекций, находящуюся в специальном флаконе, в течение определенного времени пропускается исследуемый газ. Вода отфильтровывается и контаминирующие организмы выявляются путем инкубации фильтра на питательном агаре.

Если фирма имеет собственное пробоотборное оборудование для газов, можно установить и микробиологическую нагрузку в определенном объеме воздуха. Альтернативным решением является встраивание в систему расходомера и измерение объема проходящего газа.

Автор: Яна Гаклова (Jana Haklov?), доктор наук, эксперт компании FAVEA

ISO 14644-4: Проектирование, сооружение и пуск

Международные эксперты внесли значительные изменения в стандарты серии ИСО 14644, связанные с чистотой воздуха по аэрозольным частицам, и теперь пришло время промышленности высказать свои комментарии по этому поводу

Начиная с 2000 года производственные предприятия, выпускающие продукцию в чистых помещениях и других контролируемых средах, использовали стандарты ИСО 14644-1 – «Часть 1: Классификация чистоты воздуха» и ИСО 14644-2 – «Часть 2: Требования к контролю и мониторингу для подтверждения постоянного соответствия ИСО 14644-1» в качестве международных стандартов для квалификации (аттестации) своих чистых помещений. В декабре прошлого года рабочая группа ИСО, разработавшая эти два основополагающих документа, выпустила пересмотренные версии стандартов в виде «Final Draft International Standards – FDIS», т.е. подготовленных к утверждению проектов новых версий вышеупомянутых стандартов. Хотя согласование и утверждение этих проектов в качестве международных стандартов еще впереди, FDIS-версии уже сейчас могут использоваться в качестве рекомендательных документов по соглашению между заказчиками и поставщиками. Таким образом, всем специалистам, которые связан с чистыми помещениями, очень важно понять не только процедурные изменения, содержащиеся в проектной версии новых стандартов, но также и причины внесения таких изменений.

В новой FDIS-версии стандарта ИСО 14644-1 «Часть 1: Классификация чистоты воздуха» рабочая группа WG 1 технического комитета ISO/TC 209 (в которую входят эксперты, разработавшие исправления) представила упрощённый процесс классификации, использующий более точный метод, имеющий статистическую основу. Новая методика требует б?льшего количества точек отбора проб и предполагает случайный выбор их размещения, принимая во внимание различные уровни концентрации частиц в разных зонах чистого помещения. Такой подход позволяет обеспечить 95%-ную доверительную вероятность того, что не менее 90% площади чистого помещения соответствует требованиям по предельной концентрации частиц.

Как и в действующей редакции стандарта 1999 года, новая FDIS-версия ИСО 14644-1 определяет 9 классов чистоты, в каждом из которых задана максимально допустимая концентрация в зависимости от размера частиц для каждого класса (см. Таблицу 1 FDIS-версии ИСО 14644-1). Гордон Фаркварсон, ответственный за созыв рабочей группы WG 1 комитета ISO/TC 209 подчеркивает, что комитет намеренно избегал любых кардинальных изменений принципов, лежащих в основе определения классов чистоты. Так же, как и в действующем стандарте ИСО 14644-1:1999, новый стандарт ISO/FDIS 14644-1 устанавливает количество точек отбора проб для проведения классификации и критерии приёмки данных (см. Таблицу А.1 FDIS-версии ИСО 14644-1). Пользователи могут заметить критическую разницу между содержанием последней таблицы для выбора количества точек пробоотбора по сравнению с руководством, представленным в стандарте 1999 года.

Что же касается другого, сопутствующего документа, то разница между ИСО 14644-2:2000 и новой версией ISO/FDIS 14644-2 – «Часть 2: Требования к контролю и мониторингу для подтверждения постоянного соответствия ИСО 14644-1» отражает новую методику отбора проб в FDIS-версии ИСО 14644-1.

Итак, как же отразятся эти новые версии стандартов на производителях лекарственных средств и медицинских изделий? Ответ может измениться по мере прохождения документами процесса утверждения в качестве международных стандартов, но, начиная со стадии DIS (стадии рабочего проекта), эти документы в любое время можно использовать в договорных отношениях.

FDA США (Управление по контролю за продуктами и лекарственными препаратами) ещё должно публично высказаться о новых версиях этих стандартов. Однако Департамент производства и качества продукции в составе Центра по проверке и исследованию лекарственных средств FDA опубликовал официальное заявление, которое гласит: «FDA поддерживает усилия по созданию стандартов такими организациями как ISO, особенно когда документы гармонизированы в международном масштабе. Мы в 2004 году цитировали предыдущую версию ИСО 14644-1 в нашем документе «Указания по производству стерильных лекарственных средств в асептических процессах». В настоящее время у нас нет намерений публиковать свою позицию по стандарту ISO/DIS 14644-1, но мы с интересом рассмотрим его и будем надеяться на то, что многие предприятия начнут использовать данные нормативы для достижения соответствия сGMP».

Кроме того, в качестве члена консультационной группы по техническим вопросам от США – US Technical Advisory Group (US TAG) при ISO/TC 209 – FDA предоставит на рассмотрение в ИСО свои комментарии в течение шести месяцев – периода сбора отзывов, начинающегося со 2-го мая 2011 года. Отражая сбалансированный вклад американских производителей, пользователей и организаций, имеющих интерес в данной области, а также государственных экспертов, консультационная группа US TAG разрабатывает официальную позицию США в отношении DIS-версий вышеуказанных стандартов.

Анн Мари Диксон, глава делегации US TAG в комитете ISO/TC 209, объясняет, что выработка позиции США влечёт за собой активный запрос мнений от правительственных и неправительственных заинтересованных сторон через административный орган TAG — Институт исследований окружающей среды и технологий (IEST). «Новые версии стандартов влекут за собой значительные изменения процессов сертификации и, потенциально, квалификации (аттестации)» – отмечает госпожа Диксон. «Жизненно важно, чтобы все специалисты, чья сфера деятельности тесно связана с применением стандартов серии ИСО 14644, внимательно рассмотрели новые версии документов и статистику, скрывающуюся за ними». И добавляет – «Стандарты требуют достижения согласия, как при разработке, так и на практике. Период сбора отзывов предоставляет пользователям и представителям регуляторных органов уникальную возможность сформировать окончательные версии этих стандартов, что является жизненно важным для мировой промышленности и бизнеса» [Отзывы и комментарии могут быть размещены на сайте IEST - www.iest.org/i4a/forms/form.cfm?id=67].

Ответственный за созыв рабочей группы WG 1 Гордон Фаркварсон соглашается, замечая, что, так как новый вариант отбора проб сильно отличается от процедуры, принятой в стандарте 1999 года – «я подозреваю, что FDIS-версии стандарта ИСО 14644-1 вызовет гораздо большее количество отзывов, чем любая другая часть серии стандартов ИСО 14644».

Свою точку зрения Г. Фаркварсон поясняет тем, что «некоторым производителям фармацевтической продукции может не понравиться положение о случайном выборе точек отбора проб. Такой выбор точек при каждом измерении концентрации частиц в чистом помещении означает вероятность получения результатов, не совпадающих с результатами, полученными ранее». Он добавляет, что внедрение нового подхода потребует от производителей проверять большее количество точек отбора проб, в связи с чем «им придётся аннулировать свои текущие планы проведения измерений и составить их заново».

Понимая, что новый подход к отбору проб, скорее всего, вызовет расхождение во мнениях, Гордон Фаркварсон и другие члены рабочей группы WG 1 подготовили материал, опубликованный в виде статьи в январе этого года как специальное «ISO-издание» («Special ISO Edition») журнала IEST. Статья под названием «План отбора проб для классификации чистых помещений по аэрозольным частицам» сравнивает подходы к отбору проб в стандарте 1999 года и новой FDIS-версии этого стандарта, а также объясняет статистические соображения, лежащие в основе изменений. Статья доступна для ознакомления на сайте IEST (www.iest.org), и авторы поддерживают её повсеместное распространение с целью повысить понимание внесенных изменений, особенно в период сбора отзывов.

Роберт Милк (Robert Mielke), секретарь ISO/TC 209 и соавтор вышеупомянутой статьи в журнале IEST, предлагает производителям лекарственных средств и медицинских изделий держать в уме общую картину происходящего. «Хотя новые FDIS-версии стандартов ИСО 14644-1 и 14644-2 и логика, стоящая за ними, весьма важны, они описывают только часть того, что относится к квалификации и мониторингу чистых помещений в фармацевтической промышленности и производстве медицинских изделий» – говорит он. «Следует проводить дополнительные измерения, которые, в зависимости от расположения производства и производимого в данном чистом помещении продукта, могут включать микробиологические испытания, сканирование фильтров на утечку, измерения скорости воздушных потоков и другие. Также необходимо следовать предписаниям контролирующих ведомств, таким как руководства, разработанные FDA и EMA (Европейское медицинское агентство).

Контроль воздуха

В нормах GMP, FDA, USP и стандарте ISO 14698 установлены высокие требования к микробиологической загрязненности воздуха в чистых помещениях фармацевтических предприятий, а также сжатых газов, используемых в данных зонах.

Регламентированы также и требования к пробоотборникам. Так, директива FDA от 24 сентября 2004 г. предписывает производить оценку пробоотборников воздуха по физической и биологической эффективности сбора частиц, контаминированных микроорганизмами, возможности легкой дезинфекции и стерилизации прибора, а также надежности работы в ламинарном потоке.

В стандарте ISO 14698 детально прописан перечень требований, предъявляемых к мониторингу гигиены производственной среды, валидации пробоотборников и агаровых сред, используемых при отборе проб воздуха. При этом важно, чтобы при проведении валидации данных процессов были использованы стандартизированные биоаэрозоли и активный метод отбора проб, а не дающие ложные результаты методы, такие как, прямая инокуляция тестовых микроорганизмов на агаровой среде.

В настоящее время микробиологический мониторинг воздуха чистых помещений осуществляют, используя следующие основные методы отбора проб: пассивный – седиментация и активные – импакция и фильтрование. Пробоотборники различных производителей могут в одних и тех же условиях давать значительно отличающиеся друг от друга результаты, что обусловлено не только конструктивными особенностями соответствующего прибора, но и ограничениями используемого метода отбора проб.

Метод седиментации заключается в определении микробных частиц, оседающих на поверхность чашек Петри с агаром. Он не дает количественной характеристики обсемененности воздуха и служит лишь дополнением к другим методам отбора проб, так как на чашки Петри оседают лишь частицы большого размера, в то время как мелкие частицы остаются взвешенными в воздухе и не оседают на поверхности чашки. Данный метод следует комбинировать с каким-либо активным методом отбора проб. При валидации этого метода следует учитывать также эффект высыхания агара из-за длительного времени экспозиции и высокой скорости потока воздуха.

Метод импакции. Этот метод используется во многих пробоотборниках. Следует учитывать то, что высокая скорость столкновения частиц с агаровой средой может приводить к повреждению микроорганизмов, находящихся на них, потере их жизнеспособности и искажению результатов микробиологической загрязненности. Поэтому ISO14698 наряду с физической эффективностью отбора проб требует Микробиологический контроль воздуха в чистых помещениях Чистые помещения в фармацевтической, косметической, пищевой промышленности и лечебных учреждениях подлежат строгому гигиеническому контролю также проводить исследование биологической эффективности. При этом предписано определять воспроизводимость результатов в отношении сохранения жизнеспособности даже чувствительных микроорганизмов.

Метод фильтрации. Метод фильтрации обычно сопровождается повышенной (по сравнению с импакцией) гибелью микроорганизмов при осаждении на поверхности фильтра. Поэтому при применении данного метода следует запрашивать у производителей прибора данные о биологической эффективности.

При выборе пробоотборника отдел контроля качества фармацевтического предприятия должен обращать особое внимание на следующие параметры:
1. Наличие отчета о валидации измерения прибором.
2. Наличие методики калибровки прибора.
3. Возможность легкой дезинфекции и стерилизации прибора, устойчивость материалов, из которых изготовлен прибор к высоким температурам и дезинфицирующим средствам.
4. Наличие подтвержденных исследований по физической и биологической эффективности сбора.
5. Отсутствие конструктивных особенностей, которые могут приводить к увеличению значения измеряемых концентраций жизнеспособных организмов (исключение повторной аспирации воздуха).
6. Простота эксплуатации прибора и портативность.
7. Возможность проведения измерений в сжатых газах.
8. Наличие сертификата о внесении в Государственный Реестр средств измерений.

Единственным полностью валидированным в соответствии с ISO 14698 прибором среди имеющихся в настоящее время на рынке являются пробоотборники типа RCS производства компании Биотест АГ. Его пригодность для контроля воздуха и сжатых газов в чистых помещениях детально документирована.

Компания Биотест АГ, Германия предлагает пробоотборники RCS Plus и RCS High Flow , работающие по принципу центрифужной импакции. Этот метод позволяет очень эффективно и бережно осаждать микроорганизмы, содержащиеся в воздухе, исключая попадания двух микроорганизмов в одну и ту же точку и высыхание агаровой среды. Следует также учитывать, что биологическая эффективность сбора микроорганизмов в большой степени зависит и от качества используемых питательных сред. Особенностью пробоотборников типа RCS является применение готовых к использованию агаровых полосок вместо чашек Петри.

Агаровые полоски Биотест представляют собой подложки из полиэтиленового материала, на которые в заводских асептических условиях наносят стандартизированные питательные среды (как для определения общего количества микроорганизмов, так и различные селективные среды), в зависимости от того, какие именно задачи по определению микроорганизмов нужно решать отделу контроля качества. Агаровые полоски производятсяв заводских асептических условиях в соответствии с нормами GMP и упаковываются в стерилизованную ?-излучением упаковку. Каждая серия агаровых полосок имеет сертификат качества, в котором указаны состав питательной среды, а также данные об испытаниях ростовых свойств микроорганизмов. Агаровые полоски обладают большим сроком годности и хранятся при комнатной температуре.

Портативные пробоотборники RCS Plus и RCS High Flow, чувствительностью не менее 1 КОЕ/м3, способны отбирать пробу объемом до 1000 л за 10 мин при скорости осаждения микроорганизмов на агаровой среде 1-8 м/с.

Физическая эффективность сбора составляет для частиц 3-4 мкм 100%, нижняя граница обнаружения частиц составляет 0,4 мкм, что является достаточным для всех значимых биоаэрозолей. Пробоотборник имеет значительно более высокую биологическую эффективность сбора по сравнению с импактными пробоотборниками, использующими чашки Петри. Пробоотборники типа RCS можно дезинфицировать с помощью обычных коммерческих дезинфицирующих средств; ротор, в который непосредственно помещают агаровую полоску, легко автоклавируется (число автоклавирований не ограничено).

Пробоотборник дает воспроизводимые результаты и при работе в изоляторах. Он, как ни один другой пробоотборник, подходит для работы в чистых помещениях класса А.

Пользователь может самостоятельно калибровать пробоотборник с помощью программного обеспечения и анемометра.

Специальное воздухоотводящее отверстие в конструкции прибора полностью предотвращает повторный подсос уже отработанного воздуха и турбуленцию.

Дополнительная легко монтируемая насадка к прибору позволяет проводить микробиологический контроль в сжатых газах.

Пробоотборники компании Биотест – это полностью валидированная система в соответствии с ISO14698 (валидирован как пробоотборник, так и полоски с питательными средами), позволяющая автоматизировать документирование результатов мониторинга микробиологической загрязненности воздуха, используя предусмотренную систему штрих-кодирования на агаровых полосках, сохранение этих данных в пробоотборнике и заключительную передачу в компьютер.

Следует отметить, что на большинстве ведущих европейских фармацевтических предприятиях, относящихся к так называемой «Большой Фарме», мониторинг микробиологической чистоты воздуха производственных помещений производится с помощью пробоотборников типа RCS компании Биотест АГ.

Ламинат Tarkett – продукция международной компании, объединяющей 28 производств из разных стран мира

Оптимальным решением подобной задачи является разработка конструкторов ЗАО «Ламинарные системы» – КАБИНА-ИЗОЛЯТОР для взятия проб и асептической расфасовки.

Каковы преимущества данной разработки? В числе неоспоримых достоинств кабины-изолятора – большая площадь рабочего пространства, в котором можно производить нужные манипуляции с соблюдением требований по защите продукта и окружающей среды.

Схема воздушных потоков в кабине-изоляторе

Рассмотрим принцип действия кабины-изолятора.

Кабина-изолятор состоит из трех секций, из которых (1) – рабочая зона, (2) и (3) – вспомогательные рециркуляционные блоки.

Оператор заходит в рабочую зону (1), начинает производить манипуляции с продуктом. Необходимая защита достигается следующим образом: вверху кабины-изолятора установлены фильтромодули с фильтрами тонкой очистки H 14 для подачи основного объема очищенного воздуха в рабочее пространство (1) и удаления меньшего объема воздуха в окружающую среду.

В нижней части ограждений блоков (2) и (3) организованы «окна» для создания «воздушной завесы», препятствующей попаданию аэрозолей (взвесей, порошков и т.п.) в основное помещение. При этом 30% очищенного HEPA-фильтрами воздуха выбрасывается в основное помещение, а 70% подается через основной фильтр в рабочую зону.

Таким образом, представленная специалистами предприятия разработка позволяет с минимальными затратами организовать стерильное рабочее пространство для работыперсонала с сыпучими мелкодисперсными субстанциями в фармацевтических и микробиологических производствах.

Состав изделия:

• Чистая зона класса 5 по ГОСТ ИСО 14644-1-2002;
• Ограждающие конструкции, формирующие стерильную рабочую зону изделия и два вспомогательных рециркуляционных блока;
• Микропроцессорная система управления AIS LS с автоматическим поддержанием скорости
• воздушного потока в рабочей зоне вне зависимости от степени загрязненности фильтров;
• Система УФ-облучения с электронным таймером запуска и автоматическим учетом ресурса ламп УФО.

ЗАО «Ламинарные системы»
Россия, г. Миасс, Челябинская область
www.lamsys.ru

«Промышленное обозрение», октябрь №5 (16) 2009

Стандарт чистоты

Начнем с главного. Чистым помещением или чистой комнатой называется помещение, в котором счётная концентрация взвешенных в воздухе (аэрозольных) частиц и микроорганизмов поддерживаются в определённых пределах. Дополнительно контролируются влажность, температура и давление. Отсюда — особенности поддержания и определения показателей чистоты. Проектирование, оснащение (система вентиляции и кондиционирования воздуха, подготовка воды) чистых помещений, а также процессы производства должны соответствовать определенным стандартам.

Самым первым стандартом в этой области стал American Federal Standart 209 (1960-е гг.), большинство нормативов которого было использовано позже в создании стандарта ISO 14644 «Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды». Сегодня за рубежом действует целая серия стандартов, связанных с чистыми помещениями. Проектирование зданий, эксплуатация и контроль чистых помещений описываются стандартами ISO и CEN; некоторые факторы могут контролироваться организациями по защите окружающей среды IEST, FDA. Также действуют стандарты организаций, учитывающих потребности специфических отраслей, например HACCP в пищевой промышленности, GMP в области изготовления лекарственных средств и т.д.

В России действует ГОСТ Р ИСО 14644, детально регламентирующий работу с санитарными помещениями. Многие фармацевтические предприятия для выхода на рынки СНГ провели масштабную реконструкцию и переоснащение с целью получения дополнительно сертификата GMP.

В Европе (стандарт ISO 14644-1 действует и в РФ) существует четкая система классификации стерильных помещений, определяющая нормативы уровня гигиены воздуха и других загрязнений для разных типов зон. Представьте, частицы загрязнений настолько малы, что их невозможно увидеть. Единица измерений для этих частиц называется микрометром (1 мкм), равным одной миллионной части метра. Для сравнения: диаметр человеческого волоса -100 мкм. В стандарте же для стерильных помещений описываются частицы размером 0,5 мкм и меньше.

Классификация различных стандартов приведена в таблице.

Максимально допустимые концентрации частиц, частиц/м3, с размерами, равными 0,5 мкм ISO 14644-1 GMP (рабочие помещения) GMP (остальные)

В соответствии с этими требованиями определяются и выбираются соответствующие материалы и технологии оснащения чистых помещений, а также отбираются материалы, используемые при их клининге.

Источники загрязнений

Рассмотрим потенциальные источники загрязнения помещений и способы предупреждения источников загрязнений:

1. Персонал предприятий. Сотрудники предприятий должны быть одеты в специализированную одежду, которая закрывает туловище (комбинезон, или брюки и халат), голову (шапка и маска на лицо), ступни (ботинки) и руки (перчатки).
2. Воздух. Помещение оснащается приборами фильтрации и обеспечения вертикального перемещения потоков воздуха. Дополнительно устанавливаются датчики контроля давления, параметров микроклимата и т.д.
3. Поверхности. Поверхности стен и пола укладываются с применением специального химически стойкого материалы, который обеспечивает отсутствие неровностей и швов.

Уборка помещений также имеет свои особенности, о чем стоит поговорить подробнее. Существует два подхода к уборке стерильных помещений.

1. Применение одноразовых расходных материалов. Уборка помещений производится с использованием материалов недолгого срока службы, которые после уборки выбрасываются. Этот подход приводит к тому, что расходы на уборку составляют солидную долю в эксплутационных издержках.
2. Использование многоразовых микроволоконных материалов. После уборки помещений расходники, для обеспечения их стерильности, отдают в стирку и обработку специализированным организациям, работающим на условиях аутсоринга.

Материалы для уборки стерильных помещений.

Сегодня в европейских странах процесс уборки стерильных помещений и материалы должны соответствовать стандартам ISO 14644-5. Документ указывает на то, что обычные материалы не подходят для клининга чистых помещений, так как не отвечают следующим условиям: не убирают поверхности достаточно качественно, не удаляют микробов, не предотвращают дальнейшее распространение бактерий. Поэтому основные материалы, из которых изготавливают протирочный инвентарь это: полипропилен, полиэстер, в которые иногда добавляют небольшое количество целлюлозы. Для уборки пола производятся мопы Кентукки или плоские мопы из полиэстера. Все изделия стерилизуются и упаковываются в герметичные упаковки.

Основной используемый в уборке стерильных помещений инвентарь включает в себя тележки, держатели, моющие насадки и различные салфетки и мопы одноразового и многоразового использования. Моющие насадки многократного пользования изготавливаются из 100% микроволокна (полиэстер, иногда с добавлением полиамида): такие насадки могут подвергаться стерилизации различными методами большее количество раз. Помимо прочего, микроволоконные материалы убирают поверхности, удаляя бактерии с наименьшими усилиями, обладают стойкостью к температурам и химическим средствам. Например, моп изготовленный из микроволокна (100% полиэстер), соответствует требованиям для уборки помещений ISO класса 5 и GMP А + В, а микроволоконный моп со смешанным составом (70% полиэстера и 30% полиамида) подходит для уборки помещений ISO класса 4 и GMP А.

Технология уборки стерильных помещений.

Уборка стерильных помещений проводится влажным методом предварительной подготовки, так как он хорошо собирает грязь, а поверхность остается при этом практически сухой. Метод «ведро и отжим» не столь эффективен, так как требует большего количества воды. Уборка же сухим мопом способствует перемещению свободных частиц в воздушное пространство, что также нежелательно. Уборка стерильных помещений начинается с предварительной подготовки материалов: количество мопов определяется из расчета 1 моп на 25 кв.м. Салфетки и мопы укладываются на тележку и меняются в процессе уборки. В стерильных помещениях уборку начинают с самого дальнего угла и заканчивают выходом. Сначала протирают потолок и стены, затем поверхности мебели и оборудования, в конце пол. Когда уборка помещений завершена, все материалы обеззараживаются либо в прачечных на самом предприятии, либо компаниями, оказывающими сторонние услуги. Насадки и салфетки стираются и проходят стерилизацию методом автоклавирования или гамма-облучения. Каждая партия проверяется на качество обработки и готовность к следующей уборке помещений. В конце материалы тщательно упаковываются в герметичные пакеты и доставляются к месту проведения работ.

В заключение хотелось бы отметить, что в 2005 году компания Vileda Professional заключила стратегическое соглашение с концерном MicronClean, который занимается обработкой (стирка, стерилизация) расходных материалов системы СВЕП Хай-Спид для предприятий, где есть стерильные помещения. Специально разработанный компанией ассортимент моющих насадок системы и все элементы СВЕП Хай-Спид идеально подходят для уборки чистых помещений и применяются на многих европейских производствах.

ViledaPro.ru

На современном этапе развития медицины деятельность специалистов службы крови не ограничивается переливанием «теплой» крови от донора реципиенту. Трансфузиология сегодня – это комплексное фракционирование крови, переливание продуктов ее разделения и приготовление на их основе лекарственных препаратов, создание банков стволовых клеток. Таким образом, современная станция переливания крови сочетает в себе функции и лечебного учреждения, и фармацевтического   производства.

Основополагающим вопросом в организации работы станции переливания крови является обеспечение гарантированного качества и безопасности гемокомпонентов. Специалисты этой области настаивают на необходимости восприятия крови как жидкого органа нашего тела, что требует рассматривать переливание крови как трансплантацию чужеродной живой ткани с той же подготовительной работой, которая проводится при трансплантации любого иного органа. Риск микробного загрязнения должен быть минимизирован как в отношении донора и реципиента, так и в отношении обрабатываемых компонентов крови.

Помещение завальцовки флаконов

Использование специального оборудования и материалов, технологической одежды из безворсовых тканей, выполнение мероприятий по их стерилизации, соблюдение условий санитарно-гигиенического режима, подготовка персонала – это все необходимые, но не достаточные составляющие современной станции переливания крови.
Особое значение имеет тот факт, что обработка препаратов белкового происхождения исключает высокотемпературную стерилизацию, следовательно, фильтрация и асептический розлив препаратов крови требует особо чистых условий – помещений и зон класса А. Обеспечение этих условий требует создания целого комплекса чистых помещений с исключением пересечения материальных потоков различной степени чистоты, организацией помещений подготовки персонала и системой воздушных шлюзов и передаточных окон.

Помещение банка стволовых клеток

Подготовка воздуха для комплекса чистых помещений, помимо обеспечения автоматического поддержания температуры и влажности, должна включать высокоэффективную трехступенчатую очистку (фильтры класса G4, F8, H13) и бактерицидную обработку подаваемого воздуха.
Важной составляющей чистых помещений является отделка поверхностей. Ограждающие конструкции помещений должны быть герметичными. Материалы ограждающих конструкций должны выдерживать санобработку и не являться источником загрязнений.

В последние годы в число ведущих предприятий, занимающихся проектированием и строительством комплексов чистых помещений для здравоохранения и асептических производств лекарственных средств, вошла группа предприятий «Асептические медицинские системы» – «Миасский завод медицинского оборудования». К настоящему времени общая площадь чистых помещений, созданных этими предприятиями, превысила 30 тысяч м2. В их числе есть и комплексы чистых помещений для станций переливания крови – это областная станция переливания крови в г.Челябинске, областная станция переливания крови в г. Иваново, а также ГП «Банк стволовых  клеток» в  Московской  городской станции переливания крови.

Асептический производственный блок Челябинской областной станции переливания крови, созданный в 2001г., представляет собой комплекс из восьми чистых помещений классов D и C, установленных в зависимости от характера технологических процессов в соответствии с ОСТ 42-510-98. Планировочные решения комплекса помещений показаны на схемах 1 и 2:

Схема1 Расположения помещений с обозначением классов чистоты

1. Помещение предварительной фильтрации. 2. Промежуточная гардеробная. 3. Чистая гардеробная. 4. Помещение розлива во флаконы и ампулы. 5. Помещение завальцовки флаконов (бутылок). 6. Помещение временного хранения готовой продукции. 7. Промежуточная комната. 8. Помещение хранения санитарного инвентаря.

Схема2 Расположения рабочих зон,технологического оборудования и сотрудников в помещении  4

Высота столов 1, 2, 3 в зонах 1, 2 – 700 мм. Высота стола 1– 700мм., 2 – 630 мм в зоне 3.

1 – Помещение предварительной фильтрации   (класс   чистоты   D).
Через него осуществляется вход персонала из общего коридора третьего этажа на участок стерильного розлива, снабжение  полупродуктом,  технологической тарой, стерильной одеждой и удаление готового продукта на контроль и пастеризацию, а также удаление использованной технологической тары, одежды и отходов. Кроме этого в помещении может производиться лабораторная экспресс-диагностика белка и раствора лекарственного средства (ЛС), перекачка ЛС из одной емкости в другую с осветляющей фильтрацией. Помещение оборудовано газораспределительным пунктом, пультом контроля за климатическими параметрами в помещении 4 и наличием требуемого давления технологических газов, а также устройством связи с помещением 4.

2 – Промежуточная гардеробная (класс чистоты D).
Помещение оборудовано биоумывальником, электрополотенцем и вешалками.

3 – Чистая гардеробная (класс чистоты   С).
Помещение оборудовано полками для технологической одежды, скамьей, разделяющей зоны переодевания на «серую» и «чистую», и зеркалом для самоинспекции. В чистой гардеробной находится шлюз с воздушным душем для перехода в помещение 4.

4 –  Помещение   розлива   во   флаконы   и   ампулы   (класс   чистоты   С).
В помещении имеется передаточное окно в помещение 5 размером 600 х 700 мм и устройство связи с помещениями 5 и 1.

Банк стволовых клеток

Помещение имеет три зоны класса чистоты А:

• зона 1 и зона 2 – зоны стерилизующей фильтрации лекарственного средства (ЛС) и асептического дозированного розлива стерильного препарата во флаконы. Зона оборудована тремя рабочими местами (их размеры и расположение показаны на схеме 2), тележкой под бикс со стерильными флаконами, дозатором и установкой стерилизующей фильтрации (УСФ).
• зона 3 – зона асептического дозированного розлива в ампулы и их запайки.

Она оборудована двумя рабочими столами, размеры которых и расположение показаны на схеме 2, тремя стульями, тележкой под бикс со стерильными ампулами, дозатором и двумя газовыми горелками для запайки ампул, подключенными к автономным электролизным аппаратам «ЛИГА-31». На столе для запайки имеются два лотка под ампулы с готовым продуктом и два лотка под отходы.

Помещение временного хранения готовых препаратов

5 – Помещение   завальцовки   флаконов   (бутылок)   (класс   чистоты   С).
Помещение имеет передаточное окно в помещение 4 и оборудовано двумя станками для завальцовки флаконов, двумя тележками (для перемещения готового продукта в помещение временного хранения готовой продукции 6), а также двумя газораспределительными пунктами со стерилизующими фильтрами для подачи сжатого воздуха в напорные танки с ЛС. В перегородке между помещениями 5 и 4 имеются два отверстия в зоны 1 и 2 (класса чистоты А) помещения 4 для подвода шлангов с ЛС от напорных танков. Напорные танки оснащены собственными подставками на колесах. Кроме того, в этом помещении имеется устройство связи с помещением 4 и два электролизных кислородно-водородных аппарата «Лига-31».

6 – Помещение временного хранения готовой продукции (класс чистоты   С).
Помещение совмещено с чистой гардеробной и оборудовано стеллажами для временного хранения биксов со стерильной тарой, стерильной технологической тары, лотков и готового продукта. Оно разделено отодвигающейся скамьей и имеет полку для технологической одежды.

7 –  Промежуточная   комната   (класс чистоты   D).
Помещение является одновременно промежуточной гардеробной и оборудовано биоумывальником, электрополотенцем и вешалкой.

8 – Помещение  хранения  санитарного  инвентаря.
В этом помещении кроме санитарного инвентаря могут быть установлены автономные передвижные компрессоры, вакуумный агрегат и аккумулятор для эвакуационного освещения.
Целесообразность технического перевооружения службы крови очевидна. Жесткие требования к асептике на всем протяжении технологической цепи для достижения требуемой эффективности производственного процесса невозможно выполнить без использования новейших технологий, соответствующих правилам GMP и комплексы чистых помещений являются необходимым фундаментом, обеспечивающим высокие функциональные свойства и безопасность препаратов и компонентов крови.

Помещение завальцовки флаконов и Помещение розлива асептических растворов

«Чистые помещения и технологические среды»

Несмотря на очевидные преимущества новых систем для асептического производства промышленность, особенно в США, реагирует медленно. Стерлинг Клайн, руководитель отдела нормативно-правового регулирования, старший директор по разработке проектов компании Integrated Project Systems (ЛафайетХилл, Пенсильвания), говорит, что одна из причин этого состоит в том, что фармацевтические компании не считают эту задачу своей.

«Фармацевтические компании несут ответственность за обеспечение асептических условий производства, что является необходимым условием для защиты здоровья пациента, — говорит он. — Такова позиция FDA, и производители должны доказать, что их процессы решают эту задачу. FDA не диктует им, как этого добиться».

Изолирующие системы: технология в процессе изменения

«Это было препятствием, — продолжает Клайн. — Хотя изолирующие технологии зарекомендовали себя в Европе, отношение FDA выражалось словами «докажите мне»». Для этого компании должны были выделять финансовые и иные ресурсы для обоснования процесса. Однако, сегодня отмечается явный прогресс. Например, три фармацевтические компании, так называемая группа «LUM» (Lilly, Upjohn, Merck) подняли перчатку и инвестировали в обоснование процесса без гарантий того, что результаты изысканий будут приняты FDA. Сегодня FDA считает изоляторы, специализированные барьерные и роботизированные изолирующие системы шагом вперед в технологии асептического производства.

Еще одна ключевая проблема асептического производства была решена в связи с сокращением продолжительности цикла обработки, осуществляемой парами перекиси водорода, с восемнадцати часов до трех. Это положительно сказалось на гибкости системы.

Часто прогрессу мешали и внутренние противоречия. «Решениям о внедрении продвинутых асептических процессов могут препятствовать конфликты задач внутри компании, — говорит Клайн. -Руководитель смотрит на финансовые показатели и считает инвестиции в процесс, который он, возможно, и не понимает. В результате возникает позиция: если обычные чистые помещения справляются с задачей, зачем что-то менять? С другой стороны, учитывая астрономическую себестоимость некоторых современных препаратов, риск потери серии продукта из-за загрязнения также может быть огромен».

«В конечном итоге, — говорит Клайн, -задача состоит в убеждении людей. FDA допускает изоляторы как средство достижения воспроизводимых функциональных и технических характеристик. Эксплуатационные вопросы решаются. Дело сводится к менталитету корпораций и работающих в них людей, к их взглядам, предрассудкам, нерасположенности к риску и другим представлениям об изменении привычного хода вещей».

Несомненно, компании, думающие о продвинутом асептическом производстве, стоят перед важными решениями. К счастью, данных, которые могут им помочь, становится все больше. Лисфьорд из компании Valicare говорит: «Глядя на картину в целом, проектирование и ввод в действие продвинутой системы асептического производства должно быть тщательно продуманным, а конечная цель заключается в валидации FDA и/или другими агентствами. Мы считаем наилучшим подходом такую конструкцию изоляторов и фасовочного оборудования, при которой все компоненты работают в комплексе и полностью интегрированы в имеющиеся в здании системы электроснабжения, вентиляции, разводки профильных труб и трубопроводов (см. рис. 1). Мониторинг системы должен быть непрерывным. Не менее важным является и обучение персонала с целью повышения уровня их знания об асептических процессах по cGMP для защиты продукта, а также о предотвращении распространения сильнодействующих продуктов для защиты их самих».

Рис. 1. Изолирующая система, включающая (слева направо) роторную моечную машину, стерилизационный тоннель, изолятор с накопительной зоной, станцию розлива и укупорки и укрытие RABS со станцией обжимки колпачками. Фотография предоставлена Bosch PackaqinqTechnoloqy

Изготовление стерильных препаратов

В стандарте ISO 146447-7 «изолирующие устройства» рассматриваются сточки зрения фармацевтического производства. Изготовление стерильных препаратов в соседней аптеке, в больнице, в медицинском центре и т.п. регламентируется Главой 797 Фармакопеи США (USP <797>). Она выделяет низкий, средний и высокий уровень риска.

«Аптечные фармацевты работают в среде, существенно отличающейся от фармацевтического производства, -говорит Генри Д. (Хэнк) Раэ, технический консультант компании Containment Technologies Group, Inc. (Индианаполис, Индиана). — Это связано с тем, что они берут компоненты из нескольких разных источников и вручную проводят их дезинфекцию перед приготовлением лекарства. Хотя содержимое контейнера считается стерильным, снаружи он загрязнен в результате прикосновений к нему».

«В этом сегменте медико-биологической отрасли для определения оборудования также используется ряд терминов, -поясняет Раэ. — Например, они включают такие, как изоляторы, барьерные изоляторы, боксы биологической безопасности, ламинарные шкафы и боксы для асептического приготовления. Однако, какой бы термин ни использовался, задачи при работе с таким оборудование аналогичны задачам, стоящим на производстве — защите продукта и персонала».

Фирма The Baker Company (Сэн-форд, Мэн) использует термин «изоляторы». «Изоляторы приходят на смену ламинарным шкафам при аспетическом изготовлении препаратов, как правило, для внутривенного или парэнтерального введения, которые сразу вводятся пациентам, — объясняет Дэвид Иглсон, Вице-президент по развитию бизнеса. -Изоляторы с избыточным давлением используются для обеспечения стерильности в тех случаях, когда препараты не представляют опасности для фармацевта, в то время как при опасности такого воздействия на персонал применяются системы с отрицательным давлением». К последней категории относятся препараты, предназначенные для химиотерапии.

«Эти операции регламентируются USP <797>, но грядут изменения, — говорит Раэ. — Начиная с 2006 г. в отрасли рассматриваются более строгие предложения, вызывающие множество комментариев, зачастую отрицательных. Например, ставится под сомнение действенность и научная обоснованность предлагаемых изменений. Но и исходное руководство 2004 г. и предлагаемая версия 2006 г. едины в понимании того, что изоляторы не обязательно должны находиться в чистом помещении, а также того, что изолирующие системы являются более совершенными для изготовления препаратов, потому что обеспечивают высокий уровень стерильности. Короче говоря, изолирующие системы зарекомендовали себя на практике, потому что они исключают контактное загрязнение».

«Хотя обсуждение предлагаемых изменений влияет на инвестиционные решения организаций, на которые распространяется USP <797>, до принятия версии 2006 г. в силе останутся рекомендации 2004 г., — говорит Раэ. — Те, кто ждет «окончательного продукта», его не дождутся, потому что конечный продукт — это сам процесс USP, который предусматривает возможность ежегодного изменения».

Боксы биологичекой безопасности

Рис. 2. Изолятор с полной вытяжкой SterilchemGARD III, класс II продвинутый, тип В2. Используется в токсикологических и иных лабораториях, тде проводятся микробиолотические, культуральные и фармацевтические операции. Фотография предоставлена The Baker Company

Боксы биологической безопасности — еще один представитель семейства барьерных и изолирующих систем, имеющий с ними много общего и также предназначенный для защиты людей, продукта и окружающей среды от опасных биологических факторов и перекрестного загрязнения во время повседневной работы (см. Рис. 2).

«Эта задача становится все более важной, — говорит Иглсон из компании Baker. — Защита характеризуется уровнем биологической безопасности (BSL) 1, 2, 3 и 4, что соответствует ламинарным боксам класса I, II и III, последний из которых предназначен для работ с наиболее опасными биологическими агентами (BSL 3 и 4)».

«Работа с веществами, относящимися к наивысшим классам BSL должна вестись в ламинарном боксе класса III с отрицательным давлением и герметичной конструкцией, — говорит Иглсон. — Приточный и вытяжной воздух также должен подвергаться обработке, обеспечивающей защиту окружающей среды». Боксы оборудуются резиновыми перчатками, чтобы обеспечить наиболее надежную изоляцию, необходимую в случае особо опасных агентов. Некоторые боксы класса III, используемые в изоляторных лабораториях (класса BSL 3 или 4), обеспечивают асептические условия в рабочей зоне.

Конструктивные особенности

На рынке много поставщиков оборудования для современного асептического производства, и процесс выбора такого оборудования может быть очень сложным. Принимаемые с помощью экспертов решения должны учитывать особенности проводимого процесса и обеспечивать максимальную эффективность и гибкость при соблюдении действующих стандартов. Достижению этих целей могут способствовать ряд особенностей.

Надлежащее оборудование должно быть легким в очистке и дезинфекции внутри и снаружи. Этому способствует использование в конструкции нержавеющей стали, стекла, высокопрочного пластика, устойчивого к механическим воздействиям, и скругленных углов. Плюсами также являются простота доступа, встроенные распылители, переходники для подводки вакуума, хорошо расположенные сливы и возможность быстрой сушки.

Заключение

Выбор между обычными чистыми помещениями, RABS, изоляторами и их различными конфигурациями — непростая задача. Как советует Клайн, «подумайте, что вам нужно делать и спроектируйте процесс таким образом, чтобы осуществить эту задачу». Клайн предлагает заранее предусмотреть и спланировать последовательность действий, думая не столько о здании, сколько о том, что вы выпускаете продукты. «Основанное на изоляторах производство может иметь различную конфигурацию, — говорит он. — Оно подходит для флаконов и преднаполненных шприцев. При правильном проекте оно может использоваться для массового производства, а, учитывая простоту валидации очистки между сериями, оно подходит для дженериков и контрактного производства».

Изолирующие системы: технология в процессе изменения

Сжимающееся пространство

Мы имеем дело со средой, где рабочие места с ламинарным воздушным потоком и ламинарные шкафы и боксы утрачивают свое значение, а создание традиционных чистых помещений класса 100 (Класса ISO 5) часто оказывается экономически нецелесообразным.
«Чистые помещения дороги, их стоимость в биологической промышленности колеблется от 200 до 2 500 $ за кв. фут, — говорит Ричард Мэттьюз, Председатель Правления компании Filtration Technology, Inc. (Гринсборо, Северная Каролина). — Такие затраты подталкивают промышленность к поиску лучших способов изоляции или локализации критических технологических зон в меньшем пространстве. Вместо того чтобы классифицировать все производственное помещение как чистое, сосредоточьтесь на тех пространствах, где контролируемая среда является критичной. Замкнутые, контролируемые чистые технологические пространства вокруг  критического  ключевого  процесса являются экономичной альтернативой».

Меняющаяся модель постановки проблем и их решения обусловливает новое мышление, как в самой изолирующей технологии, так и в том, как чистые помещения и чистые процессы внедряются и встраиваются в процесс промышленного производства лекарственных средств и приготовление стерильных препаратов.

«Все согласны с тем, что главной целью является защита, однако при этом отсутствует единство терминологии, описывающей используемое оборудование, — говорит Джеймс Агаллоко, Президент компании Agalloco & Associates (Белль Мид, Нью Джерси). — Например, определения «изолятора» или «барьера или защитного ограждения» в медико-биологической отрасли могут различаться в разных странах, в разных прикладных ситуациях, например, в больницах и лабораториях, и даже в рамках одной организации».
В медико-биологической отрасли для обозначения изолирующих устройств используются такие термины как устройства повышенной чистоты (enhanced clean devices), защитные ограждения, боксы и изоляторы (barriers), изолирующие системы (isolation systems), а также изолирующие системы с ограничением доступа (restrictive access barrier systems — RABS), которые согласно серии стандартов ISO 14644 не являются «чистыми помещениями» в полном смысле понимания значения последнего словосочетания.

IEST (Institute of Environmental Sciences and Technology, являющийся секретариатом Технического комитета ISO 209 по чистым помещениям и свяанными с ними контролируемыми средами провел несколько раундов разработки стандарта ISO 14644-7 «Чистые помещения и связанные с ними контролируемые среды — Часть 7», который посвящен этим устройствам. Рабочая группа билась над рядом терминов, описывающих область применения стандарта и над тем, чем такие изделия или устройства отличаются от традиционных чистых помещений. В итоге был принят термин «изолирующие устройства» (separative device), которые в названии стандарта определяются как укрытия с чистым (clean air hoods) воздухом, перчаточные боксы (gloverboxes), изоляторы (isolation) и мини-окружения (minienvironments).

«Стандарт намеренно абстрагировался от конкретной отрасли промышленности. — поясняет Агаллоко. — Уточнение всех необходимых деталей оставлено на усмотрение пользователей и поставщиков оборудования в надежде на то, что они говорят на одном языке».
«Например, — говорит он, — существует различие между защитным ограждением и изолирующей системой, хотя изолирующая система может иметь защитное ограждение (барьер). За «барьер» можно проникнуть, например, перепрыгнуть через ограждение и без очереди купить билет на финальный матч. Но изолирующие системы подобны Форт Ноксу (военная база, на территории которой находится хранилище золотого запаса США), куда возможно, но не разрешено проникать без соблюдения очень строгих процедур. Слабость истинной изолирующей системы обычно заключается в использовании перчаток, называемых также устройствами доступа. Таким образом, мы сравниваем использование изолирующей системы с ограничением доступа (RABS) с «идеальным» изолятором, который за счет полной автоматизации функционирует независимо от человеческого вмешательства».

Барьерные (или изолирующие) системы с ограничением доступа (RABS) и изоляторы:  определение ISPE

В августе 2006 г. Международное общество по фармацевтическому инжинирингу (ISPE) опубликовало определение RABS. Различия между RABS и изоляторами объясняет возглавлявший Комитет ISPE по определениям Джек Лисфьорд, Вице-президент по консультационной работе отделения Valicare компании Bosch Packaging Technology (Бруклин Парк, Миннесота).

«И RABS, и изоляторы служат барьерами между операторами и критическими зонами класса ISO 5, в которых проводятся операции фасовки/укупорки, — говорит он. — В обоих случаях используются жесткие стенки, перчаточные порты и передаточные порты для компонентов. RABS обычно открыты снизу, а продукт защищается воздушным потоком. В изоляторах, напротив, защита обеспечивается за счет избыточного давления, а в некоторых случаях и разрежения, когда требуется исключить распространение загрязнения наружу. RABS эксплуатируются в помещениях класса ISO 7, а изоляторы — в помещениях класса ISO 8».
Лисфьорд отмечает, что перед началом производства серии в RABS необходима тщательная ручная очистка и дезинфекция всех не соприкасающихся с продуктом поверхностей с использованием спороцидного средства. А изоляторы обычно дезинфицируются в автоматическом режиме с помощью паров высокоэффективных дезинфектантов.
«Хотя конструкция RABS и предполагает работу в постоянно закрытом для доступа состоянии, вмешательство оператора в RABS допускается, поскольку защита продукта обеспечивается использованием НЕРА или иных фильтров, организацией контролируемого однонаправленного потока воздуха и поддержанием локального класса чистоты ISO 5, — говорит он. — При этом основная цель состоит в постоянном поддержании в критической зоне класса ISO 5».

«Некоторые фирмы используют RABS, которые никогда не открываются во время работы, и добиваются очень хороших результатов, — говорит Лисфьорд. -Другие пользуются RABS, которые, хотя и эксплуатируются в закрытом режиме, допускают редкие исключительные случаи, требующие доступа оператора в рабочую зону. Такие вмешательства создают риск для продукта и считаются отклонениями, которые подлежат обязательному документированию с целью оценки риска для подвергшегося внешнему воздействию стерильного продукта».

При этом операторы должны быть одеты надлежащим образом. Для разработки системы и контроля (т.е. защиты) процесса одинаково важно то, как это делается, и то, как вы отстаиваете свою позицию при инспекции FDA.

«Важно рассматривать RABS как концепцию, позволяющую расширить характеристики обычного оборудования и ужесточить технологический процесс, а не инвестировать непомерные средства в оборудование, — поясняет Лисфьорд. — Хотя RABS не так надежны, как изоляторы, они позволяют снизить капитальные затраты на начальном этапе и, несомненно, являются шагом вперед по сравнению с традиционными чистыми помещениями».

«Изолирующие системы технологического оборудования меняют и концептуальную схему восприятия расходов, -говорит Лисфьорд. — Такая система гораздо лучше защищает продукт, позволяя снизить иные капитальные и эксплуатационные расходы. Использование изоляторов дает возможность уменьшить площадь завода, а наличие нескольких линий приводит к сокращению численности персонала, уменьшению расходов на систему вентиляции и кондиционирования воздуха, энергоносители, а также на специальную технологическую одежду и мониторинг окружающей технологической среды».

Разумное проектное решение

Джулиан Уилкинз, Вице-президент и старший консультант компании Pharma-ConsultUS, Inc. (Бриджуотер, Нью-Джерси), говорит, что факторами, меняющими лицо биологической промышленности, являются тенденции к живым вакцинам, малым молекулам, комбинациям более крупных молекул и дорогим высокоспецифичным препаратам, не требующим большого объема производства.

«Это означает, что крупномасштабное производство, выпускающее многие миллионы доз, становится непрактичным, — полагает Уилкинз. — Строительство чистых помещений по старым стандартам для того, чтобы удовлетворить новые реалии рынка, означало бы напрасную трату миллиардов. Вместо этого мы движемся к гибким мощностям, которые удовлетворяют строгим требованиям стандартов, но предназначены для мелкосерийного производства».

Иными словами, в фармацевтическом производстве налицо тенденция к непрерывному маломасштабному производству на предприятиях, минимизирующих потребность в традиционных чистых помещениях.

Чистое мини-помещение ориентировано на производство малых объемов дорогих препаратов, а не продуктов массового выпуска. «Это производство без излишеств, — говорит Уилкинз. — На нем используется непрерывно работающее, замкнутое оборудование, которое легко мониторировать извне». Основным дополнительным достоинством таких систем является существенное снижение затрат на персонал, технологическую одежду и прочих расходов.

По мнению Уилкинза, разумный фармацевтический проект включает несколько непрерывно работающих производственных линий, основой которых являются изоляторы, которые позволяют поэтапно увеличивать или уменьшать производство в зависимости от спроса. «При таком сценарии возможен простой оборудования без существенного влияния на производительность, — говорит он. -Эти линии адаптируемы, а их конфигурацию можно изменить для производства других продуктов. При научно-обо-снованной оценке риска детали, контактирующие с продуктом, можно использовать для других веществ, а можно иметь отдельный комплект для каждого продукта. Такое производство становится гибким, поскольку не зависит от одной технологической системы».

«В проектировании фармацевтического оборудования необходима революция, — говорит Уилкинз. — Например, еще очень мало сделано в области пе-роральных твердых форм (ПТФ). Производство ПТФ уйдет от знакомого еще нашим дедам. Для создания технологической среды, необходимой для продукта, будут использоваться закрытые или изолированные системы, а оператор будет находиться в отдельной среде, комфортной для человека. В результате мы получим чистое помещение в камере, которое будет потреблять во много раз меньше энергии, чем сегодняшние традиционные чистые помещения».

Уилкинз говорит, что биотехнологическая промышленность — архитекторы, инженеры, специалисты по безопасности, соблюдению нормативных требований, разработчики, персонал ОКК, производства, упаковки и других подразделений — должна взять такое мышление на вооружение.

Джон Уилльямсон.
Статья опубликована с разрешения редакции журнала CleanRooms, АрпЧ 2007 (www.cleanrooms.com)
Перевод Семеновой Е. Ю.
«Чистые помещения и технологические среды»»

по стандарту GMP

Отрывок из новой редакции Приложения 1 «Производство стерильных лекарственных средств», содержащий внесенные в текст GMP изменения

14 февраля 2008 года была опубликована новая редакция Приложения 1 к европейским GMP – «Производство стерильных лекарственных средств».
Основные изменения коснулись краеугольного камня этого документа – таблицы классификации чистых помещений и зон. Существенно повышены предельные концентрации для взвешенных в воздухе частиц с размерами равными или более 5 мкм; подправлены цифровые данные для других размеров. В целом таблица классификации по GMP полностью приведена в соответствие с классификацией по международному стандарту ISO 14644-1.

Из классификационной таблицы GMP исчезли примечания. Теперь они развернуты и вынесены в несколько отдельных пунктов текста, следующего сразу же за таблицей. Все они носят характер разъяснений и уточнений, и, несомненно, помогут в практической работе по реализации положений новой редакции GMP. В целом можно сказать, что новый документ – шаг навстречу специалистам по технологии чистых помещений в фармацевтической промышленности и медицине.

Ниже мы публикуем отрывок из новой редакции Приложения 1 «Производство стерильных лекарственных средств», содержащий внесенные в текст GMP изменения.

Производство стерильных лекарственных средств
(отрывок)

Используемые при производстве стерильных лекарственных средств чистые зоны можно разделить на четыре типа:

• Класс A: Локальная зона для проведения операций с высоким риском, например, зона розлива, укупорки, вскрытия ампул и флаконов, соединения чего-либо в асептических условиях. Как правило, такие условия обеспечиваются рабочей зоной с ламинарным потоком воздуха. Системы создания ламинарного потока воздуха должны обеспечивать на рабочем месте при выполнении операций с незащищенным продуктом однородную скорость воздуха в пределах 0,36 – 0,54 м/с (справочная величина). Выполнение условия ламинарности потока должно быть продемонстрировано и валидировано. В закрытых изоляторах и перчаточных боксах могут использоваться более низкие скорости и однонаправленный поток воздуха.
• Класс B: Зона, непосредственно примыкающая к предназначенной для асептического приготовления и наполнения зоне класса А.
• Классы C и D: Чистые зоны для выполнения менее ответственных этапов производства стерильной продукции.

Классификация чистых помещений и устройств с чистым воздухом

4.Чистые помещения и устройства с чистым воздухом должны классифицироваться в соответствии со стандартом ISO 14644-1. Необходимо четко различать измерения с целью классификации и с целью мониторинга параметров в ходе производственного процесса. Предельно допустимая концентрация взвешенных в воздухе частиц для каждого класса приведена в следующей таблице.
5.При выполнении измерений с целью классификации с зонах А в каждой точке пробоотбора необходимый объем пробы должен быть не менее 1 м3. Класс А соответствует классу чистоты ISO 4,8 (исходя из предельной концентрации для частиц размером более 5 мкм). Класс В (в оснащенном состоянии) соответствует классу чистоты ISO 5 (для обоих размеров частиц). Класс C (в оснащенном и функционирующем состоянии) соответствует классам чистоты ISO 7 и ISO 8 соответственно. Класс D (в оснащенном состоянии) соответствует классу чистоты ISO 8. При измерениях с целью классификации минимально требуемое число точек пробоотбора, объем пробы, вычисляемый из предельно допустимой концентрации частиц большего размера; метод обработки результатов измерений выбираются в соответствии с методологией стандарта ISO 14644-1.
6.Для измерений с целью классификации следует использовать портативные счетчики частиц с короткими про-боотборными трубками из-за относительно высокой скорости оседания частиц размером более или равным 5 мкм в системах удаленного отбора проб с длинными линиями пробоотбора. При измерениях в однонаправленном потоке воздуха следует применять изокинетические пробоотборники.
7.Классификация в функционирующем состоянии может проводиться при обычном режиме работы, при имитирующих операциях или – для имитации наиболее тяжелых условий работы – при операциях наполнения продуктом. Информация об измерениях, необходимых для демонстрации соответствия ранее установленному классу чистоты, содержится в стандарте ISO 14644-2.

Мониторинг чистых помещений и устройств с чистым воздухом

8.Чистые помещения и устройства с чистым воздухом в процессе работы должны регулярно подвергаться мониторингу; точки мониторинга должны выбираться на основе надлежащего анализа риска и с учетом результатов, полученных в процессе классификации чистых помещений и устройств с чистым воздухом.
9.Для зон класса А мониторинг содержания в воздухе частиц должен проводиться в течение всей продолжительности критических операций, включая подготовку оборудования, кроме подтвержденных случаев, когда загрязнители могут повредить счетчик частиц или представляют опасность, например, являются живыми микроорганизмами или несут радиологическую опасность. В подобных случаях мониторинг процесса подготовки оборудования должен продолжаться до момента возникновения опасности. Возможен также мониторинг процесса выполнения имитирующих операций. Зона класса А должна подвергаться мониторингу с такой частотой и с такими объемами пробоотбора, чтобы зарегистрировать все вмешательства, кратковременные события и сбои в работе системы, а также включать сигналы тревоги при превышении заданных предельных значений. Допускается, что в точке розлива в процессе наполнения не всегда удается показать низкую концентрацию частиц с размерами равными или более 5 мкм из-за генерации частиц или капель самого продукта.
10.Такая же система рекомендуется для зон класса B, хотя частота измерений в этом случае может быть меньше. Важность использования системы мониторинга частиц должна определяться эффективностью разделения примыкающих друг к другу зон классов А и В. Зона класса В должна подвергаться мониторингу с такой частотой и с такими объемами пробоот-бора, чтобы зарегистрировать изменения в уровнях загрязнений и все сбои в работе системы, а также включать сигналы тревоги при превышении заданных предельных значений.
11.Система мониторинга взвешенных в воздухе частиц может состоять из отдельных независимых счетчиков частиц; из набора точек пробоотбора, последовательно подключаемых через коллектор к одному счетчику частиц; из комбинации указанных вариантов. Выбор типа системы должен соотносится с размерами измеряемых частиц. При использовании системы с удаленным пробоотбором длина пробоотборных трубок и наличие изгибов должно анализироваться с точки зрения потерь частиц в трубках. При выборе системы мониторинга следует принимать во внимание риски, связанные с использованием в производственных операциях таких субстанций, как живые микроорганизмы или радиологические лекарственные средства.
12.Объем проб, отбираемых при мониторинге с помощью автоматизированных систем, обычно зависит от скорости пробоотбора используемого устройства. Объем пробы при мониторинге не обязательно должен совпадать с объемом пробы, отбираемой при классификации чистых помещений и устройств с чистым воздухом.
13.При мониторинге зон класса А и В особое внимание следует обращать на счетную концентрацию частиц размером равным или более 5 мкм, так как она является важным инструментом для ранней диагностики сбоя в работе. Случайное превышение концентрации частиц ? 5 мкм может быть вызвано ложным срабатыванием из-за, например, электронных шумов, засветки, совпадений и пр. В то же время последовательная или регулярная регистрация некоторого уровня концентрации таких частиц является индикатором возможного загрязнения и должна быть изучена. Подобные случаи могут указывать на раннюю стадию неполадки системы воздухоподготовки, сбой в работе оборудования для розлива, могут являться следствием ошибок при выполнении обычных рабочих операций или ненадлежащей подготовки оборудования к эксплуатации.
14.Указанные в таблице уровни загрязнения для оснащенного состояния должны достигаться после короткого (15–20 минут – рекомендуемая величина) периода «очистки» помещения при отсутствии персонала и после завершения всех операций.
15.Мониторинг зон класса C и D в функционирующем состоянии должен проводиться в соответствии с принципами управления степенью риска для конечного продукта. Требования и предельные концентрации для уровней тревоги/действия выбираются в зависимости от вида контролируемых операций; при этом придерживаться рекомендованного периода «очистки».
16.Мониторинг других характеристик, таких как температура и относительная влажность, зависит от вида продукции и характера проводимых операций. Эти параметры должны соответствовать установленному стандартом уровню чистоты.
17.Примеры операций, которые нужно выполнять в зонах различных типов, даны ниже в таблице:

18.В асептическом производстве необходим частый мониторинг с использованием таких методов, как осаждение на пластины (чашки), пробоотбор в объеме воздуха и на поверхностях (например, смывы и контактные пластины). Методы пробоотбора, используемые в функционирующем состоянии, не должны вносить помехи в защиту зоны. Результаты мониторинга следует учитывать при рассмотрении документации на партию готового продукта при его отгрузке. После выполнения критических операций следует проводить контроль поверхностей и персонала. Вне технологических операций также следует проводить дополнительный микробиологический контроль, например, после валидации систем, очистки и уборки.
19.Рекомендуемые значения предельных уровней микробиологического загрязнения чистых зон в функционирующем состоянии:

Примечания:

• (a)приведены средние значения
• (b)отдельные чашки могут экспонироваться менее 4 часов.

20.По результатам мониторинга частиц и микробиологического мониторинга должны быть установлены соответствующие предельные концентрации для уровней тревоги/действия. Технологический процесс должен предусматривать корректирующие действия, если эти уровни оказываются превышенными.

«Чистые помещения и технологические среды»

рис. 1. Проверка на стерильность в чистом помещении

Пользователи стерильных помещений часто задают себе вопрос, касающийся одежды для чистых помещений: «Является ли дополнительная антимикробная обработка этой одежды целесообразной или излишней?»

Трудно однозначно ответить на этот вопрос. Несомненно, на первый взгляд кажется целесообразным, чтобы одежда чистых помещений для стерильных производственных зон была обработана так, чтобы не допустить усиленного роста микробов. С другой стороны, при каждом входе в производственные зоны (типа A/B по GMP), надевается свежая простерилизованная одежда (см. рис. 1 и 2), которая носится, как правило, максимально 2-4 часа.

Что может вырасти за это время на чисто синтетической и изначально стерильной поверхности?

Для того чтобы дать пользователям квалифицированный ответ на этот вопрос, фирма Dastex поручила независимой лаборатории, пользующейся всеобщим признанием (лаборатория L+S AG, Бад Боклет), провести исследование двух разных тканей для чистого помещения с целью определения, существует ли большое различие между тканью для чистого помещения с антимикробной обработкой и «нормальной» тканью для чистого помещения.

рис.2. Переодевание персонала перед входом в чистое помещение

Для испытания использовался образец ткани ION-NOSTAT-VI.2 (в дальнейшем обозначаемый как ткань A), ткань для чистого помещения, наиболее часто используемая в фармацевтическом производстве немецкоязычных стран. Она сравнивалась с признанной во всем мире тканью для чистого помещения (в дальнейшем ткань B), которая также удовлетворяет типичным требованиям стерильного производства. Дополнительно эта вторая ткань в соответствии со стандартом подвергалась антимикробной обработке (обработка Aegis Microbe Shield) специальным составом, который по данным производителя не разрушается при правильной чистке и стерилизации.

Подготовка

рис.3. Укладка куска ткани в чашку с агаром, засеянную микробной суспензией

Проведение испытания

Для испытания проникновения микробов использовали чашки Петри диаметром 14 см, залитые свежеприготовленным и хранившимся при 50 °C жидким агаром CaSo-Agar с добавкой агар-агара в расчете 10 г на литр. После затвердевания и высыхания чашки с агаром производили засевание указанной ниже смешанной суспензией микробов.
Для испытания использовались микробы типичной кожной флоры, а также транзиентные кожные микробы. Т.к. содержание микробов различно в разных партиях кожи, использовались две смешанные суспензии разной концентрации:

рис. 4. Инкубирование чашки при комнатной температуре (RT) перед взятием оттиска

• 2?106 КОЕ/см2 (соответствует составу микробов на коже головы, лба и подмышечной впадины)
• 5?103 КОЕ/см2 (соответствует составу микробов на предплечье)

Для проверки чистоты и идентичности анаэробные бактерии (тест-бактерии 1-5, см. таблицу 1) выращивали на Колумбийском кровяном агаре, а дрожжи на – агаре Сабуро.

Опытные смешанные микробные суспензии анаэробно растущих бактерий получали путем термостатирования при 36°C в течение ночи бульона CaSo, который был засеян несколькими отдельными колониями соответствующих тест-микробов.

Таблица 1

Используемые микробы
Тест-микроб

Опытные смешанные микробные суспензии дрожжей получали инкубированием опытного штамма в бульоне Сабуро в течение ночи при 30°C.

рис.5. Взятие оттиска путем прижатия Count tact-пластины к куску ткани

Количество микробов определялось методом поверхностного подсчета с помощью спиралометра, смешанная суспензия разбавлялась буферным раствором до получения конечной концентрации 5,0?103 КОЕ/см2 и, соответственно, 2,0?106 КОЕ/см2.

После высыхания суспензии микробов в каждую чашку с засеянным агаром максимум на 30 минут укладывалось по 1 куску образца, затем с помощью пластин Count tact каждый час в течение 8 часов брался оттиск (рис. 3-5). Для каждого оттиска использовали отдельный образец ткани.
Инкубирование пластин Count tact проводили в течение трех дней при 22,5 °C и затем в течение двух дней при 32,5 °C.

Результаты

Результаты представлены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2
Результаты испытаний проникновения микробов:
Смешанная суспензия микробов 5,0?103 КОЕ/см²,
¹⁾ Corynebacterium xerosis,
²⁾ Acinetobacter baumannii (5 КОЕ), Corynebacterium xerosis (6 КОЕ)

Таблица 3
Результаты проникновения микробов:
Смешанная микробная суспензия 2,0?106 КОЕ/см²
КОЕ/Counttact-пластина после часов

Обсуждение результатов

При выбранном методе испытания не отмечается заметного отличия в от ношении проникновения микробов между обоими типами ткани для чистого помещения. Хотя ткань ION-NOSTAT-VI.2 не имела антимикробной обработки, через восемь часов на ней также практически не был отмечен рост микробов. Так как в стерильной зоне (как уже отмечалось выше) одежда для чистого помещения, как правило, носится не более четырех часов, на основании полученных результатов можно считать антимикробную обработку излишней. Как правило, механической защиты проникновения, которую обеспечивает ткань для чистого помещения, достаточно для предотвращения проникновения микробов. В этом случае антимикробная обработка имеет смысл, если поверхность ткани становится мокрой, или увеличивается длительность носки одежды. Но, как правило, это исключено.

Можно поставить под сомнение необходимость антимикробной обработки одежды для чистого помещения даже для зон типа C. Одежда для чистого помещения для зон C состоит из 100%-ной синтетической ткани и обычно меняется один раз в день. (Таким образом, длительность ношения составляет около восьми часов.) При правильной обработке в прачечной, специализирующейся именно на такой одежде для чистых помещений, одежда для зон типа C (даже без последующей стерилизации) поступает из прачечной с очень малым содержанием микробов/ остаточного загрязнения. В то же время, в случае сомнения необходимо решать эту проблему (антимикробная обработка тканей для чистого помещения зон типа C) с помощью дополнительных исследований. Следует отдельно проверить, является ли достаточной механическая защита ткани от проникновения при увеличенных нагрузках, например, при многократном усаживании на стул.

«Чистые помещения и технологические среды»
Карстен Мошер, Dastex Reinraumzubehor GmbH&Co.KG, Muggenstrum, Тимо Кребсбах, Labor L+S AG, Bad Bocket
По материалам журнала ReinRaumTechnik, №1 2006